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第八章 巴氏杆菌科及黄杆菌科

目的要求:要求掌握巴氏杆菌科及相关属中致病性巴氏杆菌,放线杆菌,嗜血杆菌,里氏杆菌形态及染色特性,致病性,微生物学诊断方法及预防治疗方法。

第一节 巴氏杆菌属

本属细菌已报道有 20 多种,其中多杀性巴氏杆菌是本属中最重要的畜禽致病菌。

多杀性巴氏杆菌

1本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病的病原体,也可感染人。主要使动物发生出血性败血症或传染性肺炎。

2有三个亚种:

(1)多杀亚种

(2)败血亚种

(3)杀禽亚种

3过去实际工作中曾按感染动物名称命名,如猪巴氏杆菌,现统称为多杀性巴氏杆菌。

补:数字化管理→数据异常→立即采取措施

保温不当→细菌感染→病毒感染

4本菌广泛分布于世界各地,正常存在于多种健康动物口腔和咽部黏膜,当动物处于应激状态,机体抵抗力低下时,细菌侵入体内,大量繁殖并致病。

5在同种或不同动物间可相互传染,蜱和蚤被认为是自然传播的媒介昆虫。

1.生物学性状

形态及染色

培养及生化特性

血清型

抵抗力

1.1 形态及染色:

1两端钝圆,中央微凸的短杆状菌,大小为0.25-0.4umx0.5-2.5um,单个存在,有时成双排列。

2病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时可见典型的两极着色,革兰阴性菌。

3无鞭毛,不形成芽孢。新分离的强毒菌株有荚膜。

1.2 培养及生化特性:

1呼吸类型:需氧或兼性厌氧菌

2营养条件:对营养要求较高

(1)普通培养基上生长贫瘠

(2)麦康凯培养基上不生长

(3)加有血液、血清或微量血红素培养基上生长良好

3最适温度:为 37c

4 最适 ph:7.2-7.4

1.3 生长形态:

1在血清琼脂平板上培养 24h,可长成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落。

2在血琼脂平板上,长成水滴样小菌落,无溶血现象 (对比放线杆菌)

→血清琼脂与血琼脂不一样

3在血清肉汤中培养,开始轻度浑浊,4-6d 后液体变清朗,管底出现黏稠沉淀,震摇后不分散。表面形成菌环。

1.4 生化特性:

1培养 48h 可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖和半乳糖产酸不产气。大多数菌株可发酵甘露醇、山梨醇和木糖。

2一般对乳糖、鼠李糖、水杨苷、肌醇、菊糖、侧金盏花醇不发酵。

3可形成靛基质。触酶和氧化酶试验均为阳性,产生硫化氢和氨。

4甲基红试验和 Vp 试验均为阴性,石蕊牛乳无变化,不液化明胶。

1.5 血清型 :

1菌体(o 抗原):以菌体抗原作凝集反应,将本菌分为 16 个血清型,以阿拉伯数字表述。

2荚膜(K 抗原):以特异性荚膜抗原吸附于红细胞上作被动血凝,可分6 个血清型,用大写字母表示:A、b、c、d、E、F。

3菌血清型表示方法

o 抗原:K 抗原→如 5:A

4我国常见畜禽多杀性巴氏杆菌的血清型。

(1)禽源多杀性巴氏杆菌以 5:A 为多,其次为 8:A。

(2)猪源的以 5:A 和 6:b 为主,其次 8:A 与 2:d。

(3)羊源的以 6:b 为多。

(4)家兔源的以 7:A 为主,其次是 5:A。

(5)c 型菌时犬、猪的正常栖居菌。

(6)F 型主要发现于火鸡,致病作用均不清楚。

本菌从发病动物体液或组织中培养分离到的菌落,经 45o折光在低倍显微镜下,根据菌落有无荧光及荧光色彩可分为三个型:

蓝色荧光型(Fg):菌落呈现鲜明的蓝绿色而带金光,边缘有狭窄的红黄色带,相当于血清型 b 型,对家兔和猪毒力强大而对禽类毒力较弱。

橘红色荧光型(Fo):菌落呈现橘红色,边缘稍带狭窄黄绿光。

相当于血清型 A 型,对禽类毒力强大对畜类较弱,家兔对两型致死量无甚差异。

无荧光型(Nf):对畜禽的毒力都较弱。

1.6 抵抗力:

1本菌抵抗力不强。在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡阳光中暴晒 10min 或 56c,15min 或 60c,10min 可被杀死。

2保存:本菌接种马丁肉汤或其平板,生长后置 4c保存,每半月应移植一次。冻干菌种在低温中可保存长 26 年

→对此菌没做任何处理?不像肠道杆菌半年拿出来还有活力

2.致病性

1本菌是多种动物的重要病原菌。对家禽、野禽、猪、牛、羊、马、兔等都可致病。

急性型:呈出血性败血症迅速死亡。

亚急性型:于粘膜、关节等部位,发生出血性炎症等。

慢性型:呈现萎缩性鼻炎(猪、羊)、关节炎及局部化脓性炎症等。

补:母牛没生完小牛不产奶,用激素→成本高+泌乳量低

掌握正常动物器官颜色、形状→对比→判断是否患病

每个厂都有呼吸系统问题

猪萎缩性鼻炎 AR :

(1)大多数情况下,AR 是 d 血清型中能产生一种耐热外毒素的 p . multocidin(多杀素)与波氏杆菌混合感染所致,前者起主导作用。

(2)该耐热外毒素,可致豚鼠皮肤坏死及小鼠死亡。

用此毒素接种猪可复制典型的猪萎缩性鼻炎。

2实验动物中小鼠极易感染,鸽对杀禽亚种的易感性强。

猪肺疫→咳嗽、呼吸急促

1.毒力因子

1荚膜(透明质酸)—抗吞噬作用

2内毒素(杀禽亚种的致病力有关)

含氮的磷酸脂多糖,引致禽霍乱,表现出血性败血症状。

34 型菌毛(黏附作用)

4铁载体(多杀素)

5耐热外毒素(d 血清型的一些菌株),如 AR 的致菌株。

2.显微镜检查

1采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新鲜病料图片或触片,以碱性美蓝液或瑞氏染色液染色,显微镜检查,如发现典型的两极着色的短杆菌,结合流行病学及剖检,即可作初步诊断。

考:养殖场发生疑似猪种病例,请你拟出微生物诊断过程

2革兰染色为阴性球杆菌。

3注意:慢性病例或腐败材料不易发现典型菌体,须进行培养和动物试验。

4.动物试验

1用病料研磨制成悬液,或用分离培养菌,皮下注射小鼠,家兔或鸽子,动物多在 24~48h 内死亡。

→强调分离纯化后需接种

2由于健康动物呼吸道内常可带菌,所以应参照患畜生前临床症状和剖检变化,结合分离菌株的独立试验,作出最后诊断。

5.血清型鉴定

1若要鉴定荚膜抗原和菌体抗原型,则要用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验。

2检测动物血清中的抗体,可用试管凝集、间接凝集、琼脂扩散试验或 ELISA。

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